分(fen)光光度計是(shi)利用(yong)物質對(dui)光的(de)(de)選擇性(xing)吸收的(de)(de)特性(xing)，以較純的(de)(de)單色光作為入射光，測定(ding)物質對(dui)光的(de)(de)吸收，從(cong)而對(dui)物質進行定(ding)性(xing)或定(ding)量分(fen)析的(de)(de)儀器。在使用(yong)過程中常常會出現測量誤差(cha)，這些誤差(cha)又是(shi)如何產生的(de)(de)呢(ni)？
1.復色光對比耳定律的偏離
比耳定律成立的(de)前提條件(jian)是(shi)人射(she)光是(shi)單色(se)光，但是(shi)精度再高(gao)的(de)儀器，即使是(shi)雙單色(se)器的(de)分光光度計，也只能獲得近乎單色(se)的(de)光，無法獲得純單色(se)光，它仍(reng)然(ran)含有狹窄光通帶，具(ju)有復(fu)色(se)光的(de)性質。而(er)復(fu)色(se)光會導致比耳定律的(de)正或(huo)負偏離(li)。
固定狹(xia)縫的(de)紫(zi)外分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)光(guang)(guang)譜帶寬一般為1nm或2nm，可(ke)調狹(xia)縫的(de)可(ke)以做到0.Inm；可(ke)見分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)帶寬6nm、snm，甚(shen)至(zhi)十(shi)幾納米。
光譜(pu)帶寬應該是越(yue)小(xiao)越(yue)好，但(dan)是隨著光譜(pu)分辨率的提(ti)高，儀器(qi)的靈敏度降低，所(suo)以(yi)選擇儀器(qi)時要綜合考慮各種條件的影響。當溶液濃度較小(xiao)且單(dan)色(se)光較純(chun)時，可近似認為符(fu)合比耳定律。
2.雜散光的影響
雜散光(guang)是(shi)指進人檢測器的處于待測波長光(guang)譜帶寬范圍外的其他波長組(zu)分，它(ta)是(shi)光(guang)譜測量中誤差的主要來源。
產生(sheng)原因有:分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計的色散元件、反射鏡(jing)、透鏡(jing)及單色器內壁灰(hui)塵等。在(zai)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計工作(zuo)波(bo)段邊緣波(bo)長處，由于單色器透光(guang)率、光(guang)源輻射強度(du)、檢測器靈敏度(du)都較低，雜散光(guang)的影響更為顯著。
雜(za)(za)散光限制儀器的分析(xi)上限可(ke)引(yin)起(qi)嚴(yan)重(zhong)的測量(liang)誤差，實(shi)際(ji)工作中(zhong)，在(zai)定量(liang)分析(xi)時，一般在(zai)吸(xi)收峰或其附近(jin)處測量(liang)樣品吸(xi)光度(du)，如(ru)果在(zai)分析(xi)波長處含有雜(za)(za)散光，這(zhe)時樣品的透(tou)光率較小(xiao)，而(er)雜(za)(za)散光大部分透(tou)過，使測量(liang)吸(xi)光度(du)低于真(zhen)實(shi)吸(xi)光度(du)。
3.儀器噪聲對測t的影響
儀(yi)器噪(zao)聲(sheng)也(ye)是儀(yi)器的一個重要指(zhi)標，它表征儀(yi)器做稀溶液(ye)的能力(li)。是疊加在(zai)待測量的分(fen)析信號(hao)中的不需要的信號(hao)，掃描100%T和0%T線，可觀察到分(fen)光(guang)光(guang)度計的絕對噪(zao)聲(sheng)水平，如果儀(yi)器噪(zao)聲(sheng)較(jiao)大，會(hui)掩蓋(gai)較(jiao)小的測量信號(hao)，一般用噪(zao)音(yin)的二倍來表示儀(yi)器的靈敏(min)度。
4波.長和吸光度準確度
樣品的(de)每一個(ge)值都是在一定(ding)的(de)波(bo)長下(xia)測得(de)的(de)，如果波(bo)長誤差(cha)很(hen)大，測出(chu)的(de)值肯定(ding)不準。吸(xi)光(guang)度準確度也是用戶對(dui)儀器的(de)直(zhi)接要求，更應引起(qi)足夠(gou)的(de)重視。
國(guo)家計(ji)量(liang)檢(jian)定規程規定雙光(guang)束紫外可見分光(guang)光(guang)度計(ji)透射比(bi)準確度為(wei)A級(ji)士0.6%， B級(ji)土1.0%。
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