分光(guang)光(guang)度(du)計是利用物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)對光(guang)的選擇性(xing)吸收的特性(xing),以較純的單色(se)光(guang)作(zuo)為入射光(guang),測定物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)對光(guang)的吸收,從而對物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)進(jin)行(xing)定性(xing)或(huo)定量(liang)分析的儀器。在使用過(guo)程中常常會出現測量(liang)誤差,這些誤差又(you)是如何(he)產(chan)生的呢?
1.復色光對比耳定律的偏離
比(bi)耳(er)定(ding)律成(cheng)立的(de)(de)前提條件是人射(she)光(guang)(guang)(guang)是單(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang),但(dan)是精度再高的(de)(de)儀器,即使(shi)是雙單(dan)色(se)器的(de)(de)分(fen)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度計,也只(zhi)能獲得近(jin)乎單(dan)色(se)的(de)(de)光(guang)(guang)(guang),無法獲得純單(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang),它仍(reng)然(ran)含有狹窄光(guang)(guang)(guang)通帶,具有復色(se)光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)性質。而復色(se)光(guang)(guang)(guang)會導致比(bi)耳(er)定(ding)律的(de)(de)正或負偏離。
固定狹縫的紫外分光光度(du)(du)計(ji)光譜帶(dai)寬一般為1nm或2nm,可(ke)調狹縫的可(ke)以做到(dao)0.Inm;可(ke)見分光光度(du)(du)計(ji)帶(dai)寬6nm、snm,甚(shen)至十幾納米(mi)。
光譜帶寬應該是(shi)越小(xiao)越好,但(dan)是(shi)隨著光譜分辨率(lv)的(de)提高,儀器的(de)靈敏度降(jiang)低,所(suo)以選擇儀器時(shi)要綜合考慮各種條(tiao)件的(de)影響。當溶液濃(nong)度較(jiao)小(xiao)且單(dan)色光較(jiao)純時(shi),可近似認(ren)為符合比耳定(ding)律。
2.雜散光的影響
雜散光(guang)是指(zhi)進(jin)人檢(jian)測(ce)器的處于(yu)待測(ce)波長光(guang)譜帶寬范圍外的其他波長組(zu)分,它是光(guang)譜測(ce)量中誤差的主要(yao)來源。
產生原因(yin)有:分(fen)光光度(du)計的(de)色(se)散元件(jian)、反射鏡、透鏡及(ji)單色(se)器(qi)內壁(bi)灰塵等。在分(fen)光光度(du)計工作波段邊緣(yuan)波長處,由于單色(se)器(qi)透光率、光源輻射強度(du)、檢測器(qi)靈敏度(du)都較低(di),雜散光的(de)影響更為(wei)顯著。
雜(za)散光(guang)(guang)(guang)(guang)限(xian)制儀器的分(fen)析上(shang)限(xian)可引(yin)起(qi)嚴(yan)重的測(ce)量誤差,實際工作中,在(zai)定量分(fen)析時(shi),一般在(zai)吸收(shou)峰或其附近處測(ce)量樣品吸光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du),如果在(zai)分(fen)析波長處含有雜(za)散光(guang)(guang)(guang)(guang),這時(shi)樣品的透(tou)光(guang)(guang)(guang)(guang)率較(jiao)小,而(er)雜(za)散光(guang)(guang)(guang)(guang)大(da)部(bu)分(fen)透(tou)過,使測(ce)量吸光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)低于真實吸光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)。
3.儀器噪聲對測t的影響
儀器噪(zao)(zao)聲(sheng)也(ye)是儀器的(de)一(yi)個重(zhong)要指標,它表征儀器做(zuo)稀(xi)溶液的(de)能力。是疊(die)加(jia)在待(dai)測量(liang)的(de)分析信號(hao)中的(de)不需要的(de)信號(hao),掃描100%T和0%T線,可觀察到分光光度(du)計的(de)絕對噪(zao)(zao)聲(sheng)水平,如果儀器噪(zao)(zao)聲(sheng)較大,會掩蓋較小的(de)測量(liang)信號(hao),一(yi)般用噪(zao)(zao)音的(de)二倍(bei)來表示儀器的(de)靈敏度(du)。
4波.長和吸光度準確度
樣品的(de)(de)每一個值都是(shi)在一定的(de)(de)波(bo)長下測得的(de)(de),如(ru)果波(bo)長誤(wu)差很大,測出的(de)(de)值肯定不準。吸光度(du)準確度(du)也是(shi)用戶對儀器的(de)(de)直接要求,更(geng)應引起足夠的(de)(de)重視。
國家計量檢定規程規定雙光(guang)束紫外可見分光(guang)光(guang)度計透射比(bi)準確度為A級士(shi)0.6%, B級土1.0%。
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