遵循顯微(wei)鏡(jing)設計須(xu)符(fu)合樣(yang)(yang)品要(yao)求的原(yuan)則(ze),創(chuang)建(jian)了(le)一套完全模(mo)塊化(hua)的成像(xiang)平臺,可以滿足多種實驗需求。與傳統(tong)(tong)的研(yan)究(jiu)技術(例如使用微(wei)電極)相比,我(wo)(wo)們的多光子成像(xiang)系統(tong)(tong)能夠以更(geng)快速度(du)、更(geng)大(da)深度(du)和(he)更(geng)高強度(du)同時讀出(chu)和(he)操(cao)縱(zong)神經(jing)元群。我(wo)(wo)們開發了(le)一個旋轉主(zhu)體,使顯微(wei)鏡(jing)可繞(rao)樣(yang)(yang)品旋轉。我(wo)(wo)們還提(ti)供各種剛(gang)性主(zhu)體,其具7.74英寸高度(du),可圍繞(rao)物(wu)鏡(jing)提(ti)供較(jiao)大(da)的三維(wei)工作空間(jian)。
神經元活動的體(ti)內體(ti)積(ji)(ji)成像需要亞微米級(ji)空間(jian)分(fen)辨率(lv)和(he)毫秒級(ji)時間(jian)分(fen)辨率(lv)。傳(chuan)統方法(fa)通過連續掃描衍射高斯(si)光(guang)(guang)束以創建(jian)3D圖(tu)(tu)像,而基(ji)于貝(bei)塞爾光(guang)(guang)束的多光(guang)(guang)子成像依靠軸向延伸的焦點來捕獲體(ti)積(ji)(ji)圖(tu)(tu)像。激(ji)發(fa)光(guang)(guang)束的擴展景深可創建(jian)3D體(ti)積(ji)(ji)的2D投影,從而有效地將(jiang)2D幀速(su)率(lv)轉換為3D體(ti)積(ji)(ji)速(su)率(lv)。
三光(guang)子(zi)激發(fa)非(fei)常適合(he)深層組織成像,且需要高脈(mo)沖能量激發(fa)源,通常在(zai)1300 nm或1700 nm附近(jin)。與雙光(guang)子(zi)成像相比,三光(guang)子(zi)成像可減(jian)少組織散射并降低(di)離焦背景,從而提高信(xin)噪比。
Thorlabs的(de)空間光調制(zhi)器(SLM)使用(yong)全息圖案來同時刺激(ji)(ji)樣品中多個位置的(de)光活化。SLM設(she)計用(yong)于通過飛秒(miao)脈沖進行雙光子(zi)激(ji)(ji)發,SLM可控制(zhi)激(ji)(ji)勵激(ji)(ji)光束輪廓上的(de)相位以生成數百個用(yong)戶確定的(de)焦點(dian)。